在掃描電鏡（SEM）中，為了對比同一區域在不同放大倍數下的圖像細節差異，可以使用圖像處理軟件實現“多重圖層疊加”對比。這種方法在分析結構演化、材料界面或缺陷局部特征時非常實用。以下是完整的操作思路：

一、采集圖像時的準備工作

確保成像區域相同

在不同放大倍數下拍攝圖像時，務必保持中心位置一致。可使用樣品臺坐標精確定位，或以標記結構為參照。

保存圖像格式一致

可使用 .tif 或 .png 格式，避免壓縮丟失細節。

標記放大倍數、圖像尺寸

命名時標注倍率如：sample_1kx.tif、sample_10kx.tif，方便后續對齊。

二、使用圖像處理軟件疊加圖層

可使用如下任一工具進行疊加操作：

ImageJ / Fiji

Photoshop

Igor Pro（借助圖像波形疊加）

GIMP、MATLAB、Python 等也可實現

三、在 ImageJ / Fiji 中操作示例

步驟 1：導入圖像

打開軟件，File → Open 依次導入不同倍率圖像。

步驟 2：對齊圖像

使用 Plugins → Registration → StackReg 或 TurboReg 插件自動對齊；

或手動調整位置和縮放，讓高倍圖像與低倍圖像對齊。

步驟 3：疊加圖層

Image → Color → Merge Channels 將不同圖像分配到 R/G/B 通道，實現色彩疊加；

或 Image → Overlay → Add Image 添加為透明圖層進行對比；

可調整圖層透明度，使細節在上下圖中切換可見。

步驟 4：設置圖層混合或遮罩

用 ROI 工具選定某一區域，在高倍圖中展示詳細結構，其他區域保持低倍圖，形成“局部高分辨疊加”效果；

可做圖層遮罩（mask）控制顯示范圍。